博股论金配资再加入1 mL完全培养基重悬

为了引导学生对科研领域的兴趣，以及对当前乳腺癌现状的关注，2025年6月13日—6月19日，豫北医学院生命科学院姬国杰老师带领槲皮素通过抑制E2F2调控雌激素信号通路抑制乳腺癌的侵袭和转移暑期社会实践团，于豫北医学院生育力重点保存实验室，开展2025年暑假“三下乡”活动。

6月13日至6月19日，在姬国杰老师的带领下，团队相继开展了：1. 海藻药物靶点的下载；2. 权重基因共表达网络分析；3. 基因本体论和京都基因与基因组百科全书富集分析；4. 蛋白质-蛋白质相互作用网络分析；5. 分子对接；6. 细胞复苏；7. 细胞传代；8. CCK-8实验确定槲皮素和雌激素信号通路抑制剂影响乳腺癌细胞的增殖等多项活动。

首先团队对该项目进行了生物信息学的分析，即：1. 海藻药物靶点的下载；2. 权重基因共表达网络分析；3. 基因本体论和京都基因与基因组百科全书富集分析；4. 蛋白质-蛋白质相互作用网络分析；5. 分子对接。基于这些得出的信息团队确定了该项目的可行性。

紧接着为了实验开展的顺利进行，对MDA-MB-231细胞进行复苏与传代。首先开启水浴锅预热至37℃，将冻存的MDA-MB-231细胞株和4T1细胞快速解冻，分别转移至离心管中，以1000 rpm，离心5 min，弃去上清，再加入1 mL完全培养基重悬，转移至细胞培养瓶，加入完整培养基至5 mL，5%CO2、37℃培养箱中培养。然后培养细胞至细胞密度达80%～90%，移除旧培养液，生理盐水冲洗2次，加入1 mL0.25%胰酶消化液，倒置显微镜下观察，待大部分细胞皱缩变圆，立即加入2 mL培养液终止消化，用移液枪轻轻吹打细胞，使细胞脱落，移至15 mL离心管中，1000 rpm离心5 min，弃上清，加入培养液重悬，制成2×104个/mL浓度细胞悬液，移入T25培养瓶中，37℃、5%CO2箱中培养。

最后CCK-8实验确定槲皮素和雌激素信号通路抑制剂影响乳腺癌细胞的增殖，槲皮素和雌激素信号通路抑制剂处理组浓度梯度均设为0、5、10、20、50、100 μM。同细胞传代培养法收集MDA-MB-231细胞和4T1细胞，调整细胞浓度至2×104个/mL，接种于96孔板（每孔100 µL）MDA-MB-231细胞适应性生长48 h，4T1细胞适应性生长24 h。按实验要求分别向96孔培养板各孔中加药，每组设置5个重复，MDA-MB-231细胞孵育48 h，4T1细胞孵育24 h。加入CCK-8检测液，使每孔100 μL培养基中含有10 μL的CCK-8检测液，将培养板置于培养箱孵育1 h后用酶标仪测定450 nm的吸光度。最终得出槲皮素对乳腺癌细胞具有一定抑制作用。

通过本次暑期“三下乡”活动，培养了团队成员对科学研究的极大兴趣。同时还锻炼了团队每个人的实验技巧。团队在姬国杰老师的引导下，团队反思了当前乳腺癌所带来的一系列问题。（彭泓语）

责任编辑：李震

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